Δ是通过从感兴趣转录

本的值中减去的值来计算的。然后通过从癌组织的Δ中减去匹配的正常人乳腺组织的Δ来计算ΔΔ或者从建立的癌细胞系中减去细胞系的Δ。根据方程ΔΔ计算基因的倍数变化。质粒构建定点诱变和报告基因分析先前描述了融合表达载体的构建。使用克隆作为模板对的非翻译区进行扩增并亚克隆到萤火虫荧光素酶表达盒下游的载体中。

通过测序验证了正确的序列

和方向。定点诱变试剂盒用于生成突变体其中删除了识别的种子序列。报告质粒总质粒μ用转染到指定的癌细胞中然后接种到孔板×每孔细胞。小时后收集细胞使用双荧光素酶报告基因测定系统麦迪逊威斯柬埔寨电邮清单康星州进行测定。对于共转染实验将合成的模拟物或阴性对照添加到转染混合物中。所有实验均一式三份进行数据取至少三次独立实验的平均值。

基质胶侵袭实验如所述使用

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的基质胶侵袭室评估亲代细胞和转染细胞的侵袭潜力。寡核苷酸序列用于扩增整个或单个种子序列的基因组的寡核苷酸引物序列以及用香港 WhatsApp 号码列表于诱变的引物均来自圣地亚哥加利福尼亚州并列于补充表中。统计分析数据表示为至少三个独立实验的平均值±标准误差。使用未配对的学生检验测试结果的显着性。对表达的细胞中重新表达的基质胶侵袭数据应用双向方差分析测试。