在使用这些样品之前通过将

它们单独包埋在最佳切割温度封片剂中并制备冰冻切片苏木精和伊红&染色载玻片来进行质量保证。使用标准分级系统对肿瘤进行分级。对于肿瘤块来说检查冰冻切片载玻片如果除肿瘤外还存在非肿瘤组织则对其进行修剪以获得给定块内最高百分比的肿瘤细胞构成。支持信息表总结了这些肿瘤的其他临床特征。还检查了正常组织切片以确保仅存在非肿瘤性乳腺组织。

然后将冷冻的组织块在低温恒

温器上切片以获得个十微米的切片。细胞培养转染和免疫印迹建立的人类癌细胞系获自美国典型培养物保藏中心并如前所述进行培养。如前所述进行瞬时转染和免疫印迹。半定量和实时定量按照制造商的说明使巴西电邮清单用试剂从已建立的癌细胞系和冷冻组织切片中提取总。生成并用作半定量逆转录酶聚合酶链反应的模板如前所述进行。

使用人类检测试剂盒通过实时定

量对的表达水平进行定量。逆转录反应使用逆转录试剂盒按照制造商的说明进行。使匈牙利 WhatsApp 号码列表用各自的基因特异性引物表和对钙粘蛋白和磷酸甘油醛脱氢酶表达水平进行定量荧光素按照制造商的说明进行操作。在系统上进行定量其中反应混合物在°下孵育分钟然后进行个循环即°秒和°分钟。使用软件计算循环阈值。使用−ΔΔ方法对每个转录本的表达水平进行标准化相对于。