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小檗碱后测定荧光素酶表达

水平。染色质免疫沉淀分析如前所述,使用进行测定以确定和与启动子区域的结合。使用单克隆小鼠抗和单克隆小鼠抗进行免疫沉淀。使用启动子正向引物和反向引物对和的结合进行定量。反应包括在°下初始变性分钟,然后在°秒°秒和°秒进行个循环,如前所述。产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。细胞活力测定将细胞以个

细胞孔的浓度铺在孔板中并孵育过

夜,然后暴露于各种浓度–μ的化合物中长达和小时。如前所述,使用染料测定细胞活力。使用多重检测酶标仪,,,在处测量吸光度。测定和流式细胞术用不同浓度的小檗碱处理细胞长达小时,并使用荧光检测试剂白俄罗斯手机号码列表盒,,,按照制造商的方案测量活性。如我们之前的报告所述,在用不同浓度的小檗碱处理小时后,对细胞进行分析。结果小檗碱与四链体的体外相互作用在这项研究中,我们首

先使用聚合酶终止测定检查了小檗碱及其结构

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类似物图与四链体的相互作用。在此测定中,模板上四链体等二级结构的形成或这些结构希腊电话号码列表的配体介导的稳定预计会在引物延伸过程中阻止聚合酶的进展。如图所示,在小檗碱存在的情况下观察到被抑制产物的量呈剂量依赖性增加,表明该化合物在其类似物中与四联体的相互作用最强。为了进一步验证四链体与小檗碱的稳定性,

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