泳道和代表使用相同模板的双脱氧

测序反应作为识别准确终止位点的标记。泳道代表凝胶上游离引物的位置全尺寸图像硫酸二甲酯足迹打印按照我们之前的研究中所述使用,标记的和寡核苷酸进行足迹印迹。 简而言之将折叠成四链体构象的寡核苷酸用处理分钟然后在非变性凝胶上解析。从凝胶中回收每个带并在乙醇沉淀后用哌啶处理。

切割产物与测序标记一起在变性上解

析。将凝胶干燥并在扫描仪匹兹堡宾夕法尼亚州美国上读取荧光进行分析。圆二色Argentina电子邮件列表光谱法在缓冲液和存在下将寡核苷酸稀释至μ链浓度并通过在°变性分钟并缓慢冷却至室温来形成四链体结构。 使用分光光度计美国马里兰州记录温度波长光谱使用光程的石英池仪器扫描速度为在,波长范围内响应时间为温度从°升至°。

是通过在处使用°的温度梯度从°到°监测摩

尔椭圆率与温度曲线来确定的如前所述。细胞中合成的逆转录分析如前所述通过测定用浓哥伦比亚电报号码数据度增加的小檗碱处理和小时后细胞中的表达。所用引物如下正向引物,和反向引物,；正向,和反向,。 如前所述使用引物正向,确定表达。反应包括在系统,上进行°初始变性分钟然后分别进行和的和个循环分别在°秒°秒和°秒。