如果不立即分析制剂将储存

在°直至进一步使用。检测为了量化我们遵循及其合著者于年发布的方案因为它允许对成熟进行高度灵敏和特异性的识别。该方案包括使用长茎环引物对成熟进行逆转录然后通过检测。为每个待定量的单独设置逆转录反应。获得的立即用于进一步的分析。的合成类似物的合成类似物从俄罗斯订购并在°下冷冻保存在中直至需要。

当用作对照时将类似物溶解在去离子水中

并直接添加到反应混合物中省略纯化分离步骤。寡核苷酸引物和探针所有寡核拉脱维亚电子邮件列表苷酸包括双标记探针均由俄罗斯生产。使用在线软件工具美国设计寡核苷酸序列。为每个设计了几组引物和探针组合并且那些表现出高逆转录和效率的引物和探针组合用于所有下游分析。使用已知浓度的合成类似物获得的定量循环值来评估逆转录效率。

通过绘制一系列稀释液的校准曲线来计算每个引

物探针组合的扩增效率从临床样品中分离的显示出高水平的目标。不同扩增的值范围为至。用于检测的寡核苷酸组通过市售试剂美国进行验证。在线性范围内我们的系统和的之间的差异不超过。反阿富汗电报号码数据应效率的差异不超过。逆转录每个反应的总体积为μ。反应混合物含有μ制剂海藻糖缓冲液俄罗斯每种逆转录酶俄罗斯μ适当的引物。